Obtención de BACs basados en el virus de la pseudorrabia sin las secuncias de empaquetamiento por recombinaciín homóloga en E. Coli

Autores/as

  • Lourdes Varela Prieto, PhD(c) Universidad Libre

Palabras clave:

Amplicones, Pseudorrabia, Recombinación homóloga, Secuencias pac

Resumen

Los vectores basados en herpes simplex presentan grandes ventajas, tales como ser neurotrópicos, eficiente infec- ción, establecimiento de latencia, capacidad para transportar grandes cantidades de ADN, pero también presen- tan un gran inconveniente al ser un virus patogénico para humanos, que aunque sufra modificaciones para alterar su virulencia esta nunca puede ser descartada. Las secuencias de empaquetamiento (pac) son necesarias para el correcto corte y empaquetado del virus y se encuentran ubicadas en los fragmentos BamHI-13 y 14’ respectiva- mente, con un tamaño de 3,2 Kpb. El objetivo del estudio fue obtener BACs basados en el virus de la pseudorrabia sin las secuencias de empaquetamiento (pac). La modificación de los BACs de PRV se hizo por recombinación homóloga en células DH10B y la recombinación se comprobó por análisis de hibridación.

 

Descargas

Referencias

1.Frenkel N, Vlazny D, Locker H. Eukaryotic Vi- ral Vectors. Edited by Y. Guzman. Cold Spring Harbor, N. Y.; 1982.

Kwong AD, Frenkel N. Herpes simplex virus amplicon: effect of size on replication of constructed defective genome containing eukaryotic DNA sequences. J. Virol. 1984; 51:595-603.

3.Fraefel C, Jacoby DR, Braekefield XO. Herpes simplex virus type 1-based amplicon vector systems. Adv Virus Res. 2000; 55:425-51.

4.Saeki Y, Breakefield XO, Chiocen EA. Impro- ved HSV-1 amplicon packaging system using ICP27-deleted, oversized HSV-1 BAC DNA. Methods. Mol Med. 2003; 76:51-60.

5.Spaete R, Frenkel N. The herpes simplex vi- rus amplicón: a new eucaryotic defective virus cloning-amplifying vector. Cell. 1982; 30(1):295-304.

6.Saeki Y, Ichikawa T, Saeki A, Chiocca EA, To- bler K, Ackermann M, et al. Herpes simplex virus type 1 DNA amplified as bacterial arti- ficial chromosome in Escherichia coli: rescue of replication-competent virus progeny and packaging of amplicon vectors. Hum Gen Ther. 1998; 9:2787-94.

7.Smith GA, Enquist LW. A self-recombining bacterial artificial chromosome and its appli- cation for analysis of herpes virus pathoge- nesis. Proc. Natl. Acad. 2000; 97:4873-8.

8.Narayanan K, Williamson R, Zhang Y, Stewart AF, Ioannou PA. Efficient and precise engi- neering of a 200 Kb B-globin human/bacte- rial artificial chromosome in E. coli DH10B using an inducible homologous recombina- tion system. Gene Therapy. 1999; 6:442-7.

9.Sambrook J, Russell DW. Molecular cloning: a laboratory manual, 3rd ed. Cold Spring Har- bor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N. Y.; 2001.

10.Tabares E. Detetion of DNA viruses by radioactive DNA probes: application to African swine fever virus. Arch Virol. 1987; 92:233-42.

11.Enquist LW, Husak PJ,. Banfield BW, Smith GA. Infection and spread of alphaherpesvi- ruses in nervous system. AdvVirus Reearch. 1998; 51:237-347.

12.Tyler CM, Wuertzer CA, Bowers WJ, Fede- roff HJ. HSV amplicones: Neuro applications. Curr. Gene Ther. 2006; 6:337-50.

13.Winkeler A, Sena-Esteves M, Paulis LE, Li H, Waerzeggers Y, Ruckriem B, et al. Switching on the lights for gene therapy. Plos One. 2007; 2:e528.

Descargas

Publicado

2012-12-01

Número

Sección

Artículos

Cómo citar

Varela Prieto, L. (2012). Obtención de BACs basados en el virus de la pseudorrabia sin las secuncias de empaquetamiento por recombinaciín homóloga en E. Coli. Biociencias, 7(2), 13-18. https://revistas.unilibre.edu.co/index.php/biociencias/article/view/2798